Mezenkimal Kök Hücrelerin Periferal Kan Mononükleer Hücrelere olan Etkisinin Sitokin Düzeyinde Araştırılması

Abstract

Çeşitli hastalık tedavilerinde kullanımı araştırılan, farklı immün modülasyon işlevlerine sahip olan ve elde edilmesindeetik sorunları olmayan mezenkimal kök hücreler (MKH) çeşitli dokulardan elde edilebilmektedir. Bu çalışmada, kordonkanı (KK) ve kordon dokusu (Wharton Jelly) MKH’lerinin bağışıklık sisteminin modüle ettiği sitokinlerin üretimi vesalgılanması üzerindeki etkisi araştırıdı.İnsan göbek kordon kanından izole edilen MKH ve Periferal Kan Mononükleer Hücreleri (PKMH), flow sitometrisiile karakterize edildi. PKMH ve MKH ko-kültürü öncesi ve sonrası flow sitometrisi ile sitokin seviyeleri belirlendi.T yardımcı hücre alt grubu Th1/Th2/Th17 oranları ve sitokin seviyeleri (Interlökin-4 (IL-4), Interferon-γ (IFN-γ) veInterlökin-17A (IL-17A)). Tümör büyüme faktörü (TGF)-β, IL-4, IL-17, IFNy süpernatant sitokin seviyeleri ELISAile ölçüldü. Çalışmamızda, flow sitometri yöntemi ile yüzey belirteçleri (CD44 (%100), CD73 (%99.6), CD90 (%100),CD105 (%95)), invert mikroskopta MKH’nin plastik adherent ve morfolojik olarak fibroblastik yapısı gözlemlendi.Projede hem KK hem de WJ MKH’ler 1/10 ortak kültür MKH/PKMH oranlarında, ve 72 saatlik inkübasyon sürelerindekullanıldı.Çalışmamızda, MKH’ler ile uyarılan PKMH’lerin, birlikte kültür sonuçları kültür öncesiyle ile karşılaştırıldığında farklıimmünomodülatör özellikler gösterdiği bulundu. Hem KK hem de WJ MKH’ler ve PKMH ko-kültürü sonrasında proinflamatuvarsitokinler IFNy ve IL-17’nin hücre içi seviyeleri artarken, süpernatandaki sitokin seviyeleri önemli ölçüdeazaldı (p<0.05). Anti-inflamatuvar sitokinler arasında, IL-4, ko-kültürden sonra önemli ölçüde arttı ve süpernatandanönemli ölçüde azaldı (p<0.05). Bir anti-inflamatuvar sitokin olan TGF-β’nin süpernatanttaki seviyesi, hem KK hem deWJ MKH’ler için önemli ölçüde azaldı (p<0.05).Elde edilen sonuçlarla kordon kanı ve WJ-MKH’nin PKMH üzerindeki etkisinin belirlenmesi ve MKH’lerin uygulamaöncesi ve sonrası pro-inflamatuvar ve anti-inflamatuvar özelliklerinin belirlenmesi ile bilimsel platforma katkı sağlamasıamaçlandı. MKH popülasyonlarının immün sistem üzerindeki değişkenliği nedeniyle, MKH’lerle yapılan klinikçalışmalarda belirsiz sonuçların varlığı, çalışmaların ilerlemesini engellemektedir. MKH ve immün sistemi hücrelerininetkileşimi karmaşık bir süreci başlatır, bu nedenle MKH kaynağının seçimi ile hücre alt grupları belirlenir ve dahaspesifik ve ayrıntılı çalışmalara ihtiyaç vardır.Anahtar Kelimeler: Göbek Kordon Kanı, Göbek Kordon Dokusu (Wharton Jelly), İmmün Sistem Hücreleri, MezenşimalKök Hücreler, İmmünomodülasyon