Effects of cysteamine on sheep embryo cleavage rates

Abstract

In vitro kültür esnasında oksidatif stres gametlerin ve embriyoların gelişiminde hasarlara yol açar. Sisteamin, L-askorbik asit, beta merkaptoetanol, sistein, glutatyon gibi birçok antioksidanlar, proteinler, vitaminler oksidatif stresi önlemek için kültür medyumlarına eklenmiştir. Bu çalışma olgunlaşma medyumuna sisteamin ilavesinin koyun embriyonik bölünme oranları üzerine etkisinin saptanması için tasarlandı. Toplam 604 ovaryum 10 kerede toplandı ve 2060 koyun oositi elde edildi, doğrama metodu ile 1818 adet oosit kumulus kompleksleri seçilerek olgunlaşma amacıyla iki gruba ayrıldı (%88,25). İlk grup (Grup A) TCM-199 medyumuna sisteamin eklenen oositler, diğer grup (Grup B, kontrol) TCM-199 medyumuna sisteamin eklenmeyen oositler olarak oluşturuldu. İki grupta 24 saat boyunca 38,8 °C’de %5 CO2 altında, nemli havada in vitro maturasyon (IVM) için inkübe edildi. Oositler, IVM sonrası 50 x 107 / mL taze koç sperması ile BSOF medyumunda 18 saat süreyle döllendi. Döllenme sonrası, olgunlaşma grupları değişik kültür medyumları ile iki alt gruba ayrıldı ve Grup AI-SOF (Sentetik Ovidukt Sıvısı Medyumu), Grup AII-CR1aa (Charles Rosencrans Medyumu), Grup BI-SOF ve Grup BII-CR1aa elde edildi. Bölünme oranları döllenme sonrası 2. günde değerlendirildi. Bölünme oranları gruplar arasında istatistik açıdan önemli fark olmadan (P>0,05) sırasıyla, %59,54 (184/309), %55,44 (173/312), %65,34 (215/329), %59,34 (200/337) olarak saptandı. Sonuç olarak, TCM-199 olgunlaşma medyumuna sisteamin eklenmesinin SOF ve CR1aa kültür medyumlarındaki koyun embriyo bölünme oranları üzerine bir etkisinin olmadığı saptandı.